色谱柱是液相色谱仪分离的核心，对分离的结果有直接的影响。了解色谱柱的使用注意事项，才能更好使用色谱柱，延长色谱柱寿命。
影响色谱柱寿命的因素有很多，有的色谱柱分析几千个样品依然有很高的柱效，而有的色谱柱分析几十个样品后就出现了拖尾、分叉等问题。色谱柱寿命的长短除了和色谱柱自身的键合相（例如氨基柱使用寿命相对于C18要短）有关外，大部分原因来源于样品和流动相以及平时的使用维护。今天介绍几种液相色谱柱使用注意事项，希望能够对大家有帮助。
使用色谱柱前要阅读使用注意事项，了解色谱柱耐受的pH范围，温度上限、流速范围，是否耐受100%水相以及溶剂等注意事项。对于新色谱柱建议在使用前做柱效测试，当色谱柱出现问题时，通过再次的柱效测试来验证。
1、溶剂
使用高效液相色谱级溶剂和新制备的缓冲溶液，以尽量减少细菌生长。纯水在流动相瓶中几天时间就会长细菌，缓冲盐溶液中细菌长得更迅速，流动相中一旦有细菌产生，色谱柱就坏得很快。
在使用的过程中，要考虑溶剂的互溶性。缓冲盐通常易溶于水，难溶于有机溶剂，因此缓冲盐使用不当会使其析出，堵塞色谱柱从而导致压力升高，柱效降低，柱寿命缩短。尤其是在使用高浓度缓冲盐或者高比例的有机溶剂时，要保证在高比例有机溶剂时缓冲盐不会析出。
2、流动相 pH
为了确保最长的色谱柱使用寿命，需要维持在规定pH范围内，硅胶柱一般在2.0-8.0。因为pH过低会造成键合相水解，导致柱流失，pH过高会引起硅胶溶解，造成色谱柱塌陷，色谱柱寿命缩短。
3、压力
承受快速变化的压力或到达压力>15,000 psi（1000 bar）可能会缩短色谱柱的使用寿命。一般色谱柱都能经得起高压，但经不起突然变化的高压冲击，所以使用的过程中建议缓慢的增加流速。
以下是不同内径的色谱柱建议使用的流量范围：
2.1 mm 内径 ☞ 最大流速1.0 ml/min
3.0 mm 内径 ☞ 最大流速2.0 ml/min
4.6 mm 内径 ☞ 最大流速5.0 ml/min
4、温度
Avantor ACE Excel UHPLC色谱柱可在高达100℃的温度下运行。温度>60℃可能会缩短色谱柱的使用寿命，具体取决于所选的流动相条件。不同厂家的不同固定相的色谱柱都有温度的使用的耐受范围，建议查看色谱柱使用说明或者联系厂家确认。
5、安装在线过滤器和保护柱可以延长色谱柱使用寿命
液相色谱的保护柱安装在进样器之后，色谱柱前端，用来过滤样品和流动相中的杂质，保护色谱柱，从而达到延长色谱柱的使用寿命。保护柱具有和分析柱一样的填料，所以它不仅可以过滤流动相和样品中的杂质，更可以拦截样品中的一些强保留、强酸性和强碱性物质，防止它们对色谱柱内填料的污染和损坏。
在线过滤器是安装在色谱柱前端或者保护柱前端，用来过滤流动相和样品中的杂质和固体颗粒，在实际使用时，由过滤器的滤芯只是一块筛板，它仅仅只能用来过滤流动相和样品中的颗粒。
保护柱和在线过滤器的安装都是为了保护色谱柱，降低成本。所以当系统出现压力变高、杂质峰、色谱峰拖尾或者色谱柱的分离效果等问题时，建议直接更换保护柱或者在线过滤器的筛板。
6、减少化学污染物对色谱柱寿命的影响
对于保留性比较强的污染物，正常的分析条件流动是很难将其从柱中洗出，这样污染物就会逐步在色谱柱前端累积，当污染物累积到一定程度时，就有可能引起色谱峰拖尾或者峰分叉等情况。
对于基质复杂的样品，如果不经过前处理或者前处理不充分的时候，很容易导致色谱柱污染。为了更好的使用色谱柱，延长色谱柱的使用寿命，要尽可能的做到样品的“干净”。为了确保样品的“干净”，制样时采用SPE技术等方法，预先将色谱柱污染物质清除掉。已经被污染的色谱柱建议使用合适的流动相洗脱污染物。
7、色谱柱保存
色谱柱的存储条件将影响其使用寿命。对于硅胶基质液相色谱柱在储存前，应将色谱柱中的所有缓冲液、盐和离子对试剂冲洗出来。理想情况下，储存溶剂应与制造商提供的色谱柱初始测试色谱图所示的溶剂一致（或者咨询供应商）。色谱柱的两端要密封，防止溶剂蒸发填料床变干燥。
