研究表明亚硝胺类几乎可以引发人体所有脏器肿瘤，其中以消化道癌最为常见。在所有试验的动物中没有一种能耐受亚硝胺不致癌的。不但长期小剂量可以使动物或人致癌，而且只要一次较高剂量的“冲击”就可引起癌症发生。大量的动物实验还表明，亚硝胺能通过胎盘和乳汁引发实验动物后代发生癌肿。
NDMA是亚硝胺化合物的一种，而亚硝胺化合物、烷基-氧化偶氮等又均为常见的基因毒性杂质。基因毒性杂质（或遗传毒性杂质， Genotoxic Impurity， GTI）一般指能直接或间接损伤细胞DNA，产生致突变和致癌作用的物质，具有致癌可能或者倾向。
根据世界卫生组织国际癌症研究机构致癌物清单，NDMA和NDEA均属于2A类致癌物质，即对人类致癌性证据有限，但对实验动物致癌性证据充分的物质。同时，在ICH M7指南中明确提出亚硝胺类化合物属于具有较高致癌性的物质，因此该类化合物应在药品中予以严格控制。但是仅几年越来越多已上市药品因痕量基因毒性杂质残留而发生药品被FDA强行召回的案例。2007年的“维拉赛特锭”事件，2018年的“缬沙坦”事件，给制药企业造成了巨大的经济损失。
近些年FDA、EMEA、ICH、USP、NMPA 等众多权威机构相继发布了相关的指导原则，要求对原料药及制剂生产过程中所产生的基因毒性杂质进行分析和控制。
最近EMA发布的“MAH须知-亚硝胺信息”和该文件的问答中强调：任何情况下，MAH如发现在某药品中出现亚硝胺物质，无论检出数量高低，均应通知药监当局。这对于亚硝胺类杂质检测方法的专属性和灵敏度提出了更高的要求。美国FDA先后发布了5次关于检测药物中亚硝胺类杂质的参考方法，总结下来是两个思路：
（1）GC-MS/MS可用于测试5种亚硝胺类化合物（NDMA，NDEA，NEIPA，NDIPA，NDBA），根据药物的溶解性的差异可以选择直接进样或者顶空进样的方式。
（2）LC-MS/MS可测试NDMA和NDEA，其中雷尼替丁类药物在高温下将产生NDMA，不适合用GC-MS/MS进行检测。
而今，2020版药典二部“化学药”在安全性方面要求，进一步完善杂质和有关物质的分析方法，强化对有毒有害杂质的控制；四部通则增修订内容（第四批）中新增<遗传毒性杂质控制指导原则审核稿》。选择合适的色谱柱是确保实验结果的关键。
Avantor 针对于不同原料药中不同种类的亚硝胺类化合物，有多种液相色谱柱和气相色谱柱的解决方案。帮助您轻松解决检测难题。
其中Avantor ACE C18-AR色谱柱是FDA检测6种亚硝胺化合物的公开方法中指定的色谱柱。
液相色谱方法：适合不挥发且在溶液/流动相中稳定的化合物
美国FDA 发布的检测雷尼替丁中N-亚硝基二甲胺（NDMA）的方法
方法相关的色谱柱：
Avantor® ACE® Excel® C18-AR
中国食品药品检定研究院发布的检测雷尼替丁中亚硝基二甲胺（NDMA）方法
方法相关的色谱柱：
Avantor® ACE® Excel® C18-AR
同时分离14种亚硝胺类化合物-Avantor ACE方法
方法相关的色谱柱：
Avantor® ACE® Excel 2 C18-PFP
气相色谱方法：适合易挥发且稳定的化合物
Avantor推荐采用Hichrom HI-5气相色谱柱对亚硝胺类基因毒性杂质进行气质分析。
Hichrom HI-5气相色谱柱的特点：
低极性固定相，5%-苯基，95%甲基聚硅氧烷
超低柱流失满足对亚硝胺高灵敏度的检测要求
可提供优异峰型和分离度
方法相关的色谱柱：
Avantor® Hichrom HI-5
文章来源：公众号--艾万拓威达优尔。
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