一、仪器条件
仪器:Thermo Scientific TQS Endura
色谱柱:EICOEE® BD C18
(2.1mmx50mm,1.7μm)
柱温:40℃
进样量:5μL
流动相:A:水(含0.1%FA)
B:甲醇(含0.1%FA)
洗脱方式:梯度洗脱
表1:流动相梯度洗脱表
电喷雾电压:3500 V
鞘气压力:30 arb
辅气压力:10 arb
离子传输管:350℃
辅气温度:320℃
采集方式:多反应监测
表2:各组分母离子和子离子检测的离子对参数
二、样本前处理
1.样本的移取和沉淀:
移取300μL沉淀剂于PPT的孔中,加入100μL血浆。用热封膜仪封膜后,1800 rpm涡旋5 min。
2.获取滤液:
将PPT与接收板置于正压提取装置中,调节压力,使滤液的流速保持1-2秒/滴,收集滤液。
3.氮吹复溶:
移取200μL滤液至另一块接收板中氮气吹干后,每孔加入75μL超纯水。用热封膜仪封膜后,1800 rpm涡旋5 min。
4.上机检测:
将复溶液注入LC-MS/MS系统中进行检测。
备注:
①沉淀剂中包含内标工作液,浓度和体积可根据实验室的方法进行适当调整。
②标准曲线的前处理方法与样本相同。
三、实验结果
1、加标回收率
表3:加标回收率
从表3的加标回收率可以看出,在4种加标浓度梯度下,6种目标化合物都有较好的回收率。
2、稳定性结果
表4:稳定性结果比对
从表4的稳定性结果可以看出,与两种竞品对比,用EICOEE产品做前处理的6种目标化合物都有较好的稳定性,可以保证实验过程的良好重复。
四、订购信息